一、熒光酶標(biāo)儀和普通酶標(biāo)儀的區(qū)別在哪里
熒光酶標(biāo)儀和普通酶標(biāo)儀兩者最大的區(qū)別就是原理的不同。
1、 熒光酶標(biāo)儀
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于測(cè)樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制,當(dāng)測(cè)繪熒光發(fā)射光譜時(shí),將激發(fā)光單色器的光柵,固定在最適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長(zhǎng)處,而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),將各波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
當(dāng)測(cè)繪熒光激發(fā)光譜時(shí),將熒光單色器的光柵固定在最適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL(zhǎng)處,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動(dòng),將各波長(zhǎng)的激發(fā)光的強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀,所記錄的光譜即激發(fā)。
當(dāng)進(jìn)行樣品溶液的定量分析時(shí),將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長(zhǎng)處,將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長(zhǎng)處,由記錄儀得出的信號(hào)是樣品溶液的熒光強(qiáng)度。

2、普通酶標(biāo)儀(以光吸收酶標(biāo)儀為例)
光是電磁波,波長(zhǎng)100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,檢測(cè)被測(cè)物吸光值。
光通過(guò)被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長(zhǎng)下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測(cè)單位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度。
二、熒光酶標(biāo)儀和 普通酶標(biāo)儀哪個(gè)更好
前文已經(jīng)簡(jiǎn)單了解到了熒光酶標(biāo)儀和普通酶標(biāo)儀的區(qū)別在哪里,那么在選擇的時(shí)候,熒光酶標(biāo)儀和普通酶標(biāo)儀哪個(gè)更好呢?
1、普通酶標(biāo)儀(以光吸收酶標(biāo)儀為例)
優(yōu)點(diǎn):檢測(cè)檢測(cè)技術(shù)成熟,成本低,操作簡(jiǎn)單。
缺點(diǎn):動(dòng)態(tài)范圍窄,靈敏度比較低,特異性不強(qiáng)。
2、熒光酶標(biāo)儀
優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,可實(shí)時(shí)檢測(cè),使用方便,檢測(cè)模式多樣。
缺點(diǎn):易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響。
因此,兩者比較起來(lái),各有自己的優(yōu)缺點(diǎn),根據(jù)自己的實(shí)際情況進(jìn)行選擇即可。