一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液相色譜儀（HPLC）和液相色譜儀（LC）都是使用液體移動(dòng)相將樣品分離開來的儀器。HPLC是在LC的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的，在分離性能、分析效率、檢測(cè)靈敏度等方面均有所提高。HPLC主要應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、生化、藥學(xué)、環(huán)境分析等領(lǐng)域。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區(qū)別
雖然高效液相色譜儀和液相色譜儀都屬于液相色譜儀類別，但它們?cè)诜蛛x性能、分析效率、檢測(cè)靈敏度等方面均有所不同：
1、分離性能的區(qū)別
HPLC的分離性能比LC更好，分離效率更高，分離劑更多樣化。HPLC在柱子填充材料和柱子直徑等方面具有更多變化的選擇，可根據(jù)不同的樣品和要求設(shè)計(jì)出不同的柱子，從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。
2、分析效率的區(qū)別
HPLC擁有更快的分析速度和更快的洗脫速度，可以更快地得到分離和檢測(cè)結(jié)果。此外，HPLC中使用的柱子通常較長(zhǎng)，能夠保證更高的峰分辨率和更好的分析效率。
3、檢測(cè)靈敏度的區(qū)別
HPLC的流動(dòng)相流速更快，反相柱分離更好，它能夠在較短的時(shí)間內(nèi)，更準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)微的化學(xué)物質(zhì)，與LC相比，更適用于高靈敏度分析和有機(jī)化合物的分析。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高效液相色譜儀主要有三類：正相高效液相色譜儀、反相高效液相色譜儀和超高效液相色譜儀（超高效液相色譜儀）。
1、盡管有名稱，正相高效液相色譜儀并不是最常用的高效液相色譜儀方法。正相高效液相色譜儀使用非極性溶劑作為流動(dòng)相，硅膠顆粒作為固定相。在常規(guī)高效液相色譜儀中，與非極性化合物相比，極性化合物在固定相中會(huì)更長(zhǎng)時(shí)間地粘附在極性有機(jī)硅上。因此，非極性化合物在正常高效液相色譜儀中的洗脫速度更快。孔徑一般在3微米左右。
2、反相高效液相色譜儀是最常見的高效液相色譜儀類型。在反相高效液相色譜儀中，固定相被烴鏈（通常長(zhǎng)8-18個(gè)碳）改性，導(dǎo)致色譜柱變?yōu)榉菢O性。也使用極性溶劑。在反相高效液相色譜儀中，樣品中的極性分子會(huì)與溶劑產(chǎn)生強(qiáng)烈的吸引力，從而使它們更快地洗脫。它們也不會(huì)與非極性固定相相互作用。非極性化合物會(huì)與固定相產(chǎn)生范德華力和分散相互作用，因此它們的洗脫速度較慢。
3、與高效液相色譜儀相比，超高效液相色譜儀運(yùn)行速度更快、使用的溶劑更少且分辨率更高。色譜柱也更小，固定相顆粒的尺寸要小得多。較小的孔（亞2微米）促進(jìn)了分子更好的分離和分辨率。較短的色譜柱還可以進(jìn)行快速檢測(cè)。然而，超高效液相色譜儀不能用于干燥或未過濾的樣品，因?yàn)檩^小的孔會(huì)堵塞，這是一個(gè)昂貴且耗時(shí)的修復(fù)過程。
