一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度通常為4～7微米，切出一片接一片的蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上。這個(gè)厚度通?？梢詽M足大部分實(shí)驗(yàn)室的需求。如果需要更薄的切片厚度，則可以使用微切機(jī)進(jìn)行切割，厚度可達(dá)1-2微米，但這種切片會(huì)更脆弱，操作難度更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片的制作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組織經(jīng)不同濃度的乙醇溶液進(jìn)行逐級(jí)脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級(jí)乙醇 40min（注意：骨性及鈣化組織需在JYBL-Ⅱ脫鈣液中浸泡24h，待組織軟化后再進(jìn)行乙醇脫水步驟）。

（2）透明：組織依次浸泡于三個(gè)二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于三個(gè)石蠟缸中，每缸各1h。

（4）包埋：將液態(tài)的石蠟倒入模具盒中，再將浸好蠟的組織塊平放底部，注意切面方向朝下放置，待石蠟?zāi)毯笕サ舭窨?，完全冷卻變硬后再修整蠟塊，組織外圍的石蠟保留適中以便切片。

2、切片與貼片

切片制作將預(yù)冷的蠟塊固定在石蠟切片機(jī)上，使石蠟塊的切面與刀口成平行方向，刀的傾斜度通常15℃，轉(zhuǎn)動(dòng)輪轉(zhuǎn)推進(jìn)器，調(diào)節(jié)切片厚度為4μm，切成厚度均勻的切片。

左手持毛筆，右手旋動(dòng)切片機(jī)轉(zhuǎn)把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動(dòng)，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放在空氣中稍晾干，放置65℃烤片機(jī)上烤1h，再放置烘箱內(nèi)烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石蠟切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-二甲苯Ⅲ10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-50%酒精5min梯度脫蠟。

4、HE染色

石蠟切片入蘇木素染0.5-1分鐘min，自來水漂洗，1%鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來水漂洗，然后1%氨水水溶液返藍(lán)1min，流水沖洗數(shù)秒，放入伊紅染液中染色數(shù)秒，流水漂洗。

5、脫水封片

石蠟切片依次放入75%乙醇2min-85%乙醇2min-無水乙醇5min-無水乙醇5min-二甲苯5min透明，將切片從二甲苯拿出來中性樹膠封片。